PCR实验室基础知识
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一、 单项选择题 (共10题，每题5分，共50分)
1. PCR技术的基本原理是（ ）
A. 抗原抗体特异性结合
B. 核酸分子在电场中迁移速率不同
C. 多轮循环体外酶促合成特异性DNA片段
D. 细菌病毒的分离培养
2. 标准PCR反应流程的正确顺序是（ ）
A. 延伸 → 变性 → 退火
B. 变性 → 退火 → 延伸
C. 退火 → 变性 → 延伸
D. 延伸 → 退火 → 变性
3. 在PCR反应中，模板DNA双链解开成为单链发生在哪一步?（ ）
A. 退火
B. 延伸
C. 变性
D. 连接
4. 使用移液器进行粘稠液体的移液时，正确的操作是（ ）
A. 吸液和放液时，都应将按钮按到第一停点
B. 吸液时按到第一停点，放液时按到第二停点
C. 吸液时按到第二停点，放液时按到第一停点
D. 吸液和放液时，都应将按钮按到第二停点
5. 进行PCR体系配制时，通常应在哪个区域操作?（ ）
A. 产物分析区
B. 标本制备区
C. 扩增区
D. 试剂准备区
6. 在呼吸道病原体多重PCR检测中，可以同时检测（ ）
A. 多种不同的抗体
B. 多种不同的抗原
C. 多种不同的核酸靶标
D. 血液中的细胞因子
7. 实时荧光PCR（qPCR）中，Ct值的含义是（ ）
A. 反应结束时荧光信号的强度
B. 荧光信号达到设定阈值时所经历的循环数
C. PCR扩增反应所需的总时间
D. 反应体系的最终温度
8. 检测RNA病毒（如流感病毒、新冠病毒）时，在加入PCR体系前通常需要先进行（ ）
A. 蛋白酶K消化
B. 逆转录（RT）反应
C. 超声破碎
D. 高速离心
9. 预防PCR实验室污染的最重要措施之一是（ ）
A. 使用超纯水
B. 单向气流（试剂→标本→产物）
C. 高速离心
D. 频繁更换手套
10. 在检测人鼻咽拭子样本时，常采用内标（Internal Control）来监控（ ）
A. 仪器设备的运行状态
B. 核酸提取和扩增全过程的有效性
C. 实验室的温度和湿度
D. 试剂是否被细菌污染
二、 判断题 (共5题，每题5分，共25分。正确的打“√”，错误的打“×”)*
1. PCR扩增产物可以随意丢弃在普通垃圾桶中。
对
错
2. 使用移液器吹打混合液体时，可以快速反复吹吸多次以确保混匀。
对
错
3. 气溶胶是造成PCR实验室交叉污染的主要原因之一。
对
错
4.
实时荧光PCR（qPCR）中的荧光信号强度与反应体系中起始模板的数量成正比。
对
错
5. 在PCR反应中，引物的作用是决定扩增片段的具体范围，具有特异性。
对
错
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